试剂准备
1. 缓冲液:将缓冲液试剂袋中的试剂倒入烧杯,溶于500mi蒸馏水中,溶解、混匀即可。
室温保存(使用时装入可调定量加液器内)。
2. 酶试剂: 目前提供的酶试剂已配成溶液可直接使用。平常要在0~5℃环境下保存(在家用冰箱存放蔬菜的保鲜格中保存)。
3. 显色剂:向标有“显色剂”的试剂瓶中加入25ml缓冲液,溶解、混匀即可。室温保存。
4. 低物:向标有“低物”的试剂瓶中加入2.5ml蒸馏水,溶解、混匀即可。0—5℃环境下保存。
检测操作步骤
1. 样品提取:取2g果蔬样品(叶菜剪成宽度为1厘米左右的菜样,块根菜取1厘米左右的
表皮样品)放入三角瓶中,用可调定量加液器(5m1)加入10ml缓冲液,振荡提取2分钟
后用滤纸干滤,取出清液即为待测试液。
2. 对照测试:在lcm比色皿中,用微量移液器(100u1)加入酶100ul,用可调定量加液器(5m1)加入缓冲液2.5ml,混匀,再用另一支100ul的微量移液器加入显色剂100ul,用
20ul的微量移液器加入底物20ul。摇匀后及时放入仪器,按“对照”键进行测试。正常值为0.16—0.3。每次测试完要及时取出比色皿。新机一般两至三星期进行一次对照测试。
3. 样品测试:在1cm比色皿中,用微量移液器(100ul)加入酶100ul,用5ml可调移液管移取2.5ml待测试液加入,混匀,静置10分钟(秒表计时)后,再用另一支100ul的微量移液
器加入显色剂100ul,用20ul的微量移液器加入底物20ul。摇匀后及时放入仪器,按“样
品测量”键进行测试。每次测试完要及时取出比色皿。
4. 测试结果的判断:样品的抑制率在40%—50%之间为可疑农残超标样品,抑制率大于50%为农残超标样品,抑制率≥40%的样品需要重复检验2次以上,如有必要时,可用气相
色谱等方法作进一步确认。
其它注意事项:
试剂切勿冷冻至结冰!! 使用前请摇晃均匀。使用时用一瓶取一瓶,用完再取用新的,要防止其它物质的污染,以免溶液中毒失效,未用完的试剂可放在清洗干净的试管中并用封口,要在0~5℃环境下保存。试管可用去污粉刷洗→自来水冲洗→蒸馏水冲洗干净,不要用酸性洗液清洗,也不建议用洗洁精清洗,去污粉可在一般的闩杂商店或医药化学试剂商店买到。
防止试剂被污染的有效方法 ①器具专用原则:所有用于转移试剂或样品的器具都要专用并贴上标志,以免混用而造交叉污染。②试剂“只出不进”原则:每次测试时,从试剂瓶中吸出(抽取)的试剂不管是否使用,只要吸出来了,即便用不上或用不了造成浪费也不要放回去,否则,容易污染整瓶试剂造成更大损失,甚至影响以后的测试,产生错误的测试数据。
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